- Journal Information
- Archive
- Submission
- For Reviewers
- Statement and Policies
- 个人中心
- 退出登录
浏览全部资源
扫码关注微信
- Journal Information
- Journal Introduction
- Editorial Board
- Youth Editorial Board
- Editorial Board Charter
- Subscriptions
- Archive
- Current Issue
- Past Issues
- Priority Publication
- Virtual Collection
- Recommended Articles
- Submission
- Submission Process
- Submission Guidelines
- Download
- Contact us
- For Reviewers
- Guidelines for Reviewers
- Peer Reviewed Policies
- Statement and Policies
- Ethics and Malpractice
- Research Ethics Policies
- Repetition Detection
- Corrections and Retractions
- Editorial Policies
- Open Access Statement
- Website Responsibility
Effects of medicated serum of Siwutang on autophagy of ovarian granulosa cells in polycystic ovarian syndrome
- ZHONGGUO YAOFANG Vol. 36, Issue 2, Pages: 185-190(2025)
- 作者机构：
1.河南省中医院/河南中医药大学第二附属医院妇产科，郑州 450011
2.河南中医药大学第一附属医院生殖科，郑州 450003
- 作者简介：
- 基金信息：
DOI：10.6039/j.issn.1001-0408.2025.02.09
CLC： R965Received：23 July 2024，
Revised：2024-12-25，
Accepted：31 December 2024，
Published：30 January 2025
- 稿件说明：
移动端阅览
邵艳社,许雪梅,杨宝芹,等.四物汤含药血清对多囊卵巢综合征卵巢颗粒细胞自噬的影响[J].中国药房,2025,36(02):185-190.
SHAO Yanshe,XU Xuemei,YANG Baoqin,et al.Effects of medicated serum of Siwutang on autophagy of ovarian granulosa cells in polycystic ovarian syndrome[J].ZHONGGUO YAOFANG,2025,36(02):185-190.
邵艳社,许雪梅,杨宝芹,等.四物汤含药血清对多囊卵巢综合征卵巢颗粒细胞自噬的影响[J].中国药房,2025,36(02):185-190. DOI： 10.6039/j.issn.1001-0408.2025.02.09.
SHAO Yanshe,XU Xuemei,YANG Baoqin,et al.Effects of medicated serum of Siwutang on autophagy of ovarian granulosa cells in polycystic ovarian syndrome[J].ZHONGGUO YAOFANG,2025,36(02):185-190. DOI： 10.6039/j.issn.1001-0408.2025.02.09.
摘要
目的
2
探讨四物汤含药血清对多囊卵巢综合征（PCOS）卵巢颗粒细胞自噬的影响及潜在机制。
方法
2
取3月龄雌性SD大鼠，分别以生理盐水和不同剂量四物汤灌胃，制备空白血清和不同浓度[0.52、1.04、2.08 g/（kg·d）]四物汤含药血清。筛选四物汤含药血清干预浓度后，将人卵巢颗粒细胞KGN分为对照组（细胞不进行任何处理）、脱氢表雄酮（DHEA）组（以50 μmol/L的DHEA处理细胞48 h）、空白血清组（以50 μmol/L的DHEA处理细胞48 h后，再用10%空白血清处理72 h）、中浓度四物汤含药血清组（以50 μmol/L的DHEA处理细胞48 h后，再用10%中浓度四物汤含药血清处理72 h），观察各组细胞中的自噬体数量以及通路相关蛋白[果糖-1，6-二磷酸酶1（FBP1）、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）、磷酸化mTOR（p-mTOR）]、自噬相关蛋白[p62、微管相关蛋白1轻链3（LC3）]和FBP1 mRNA的表达水平。将（转染）细胞分为四物汤组（以50 μmol/L的DHEA处理细胞48 h后，再用10%中浓度四物汤含药血清处理72 h）、四物汤+si-NC组（以50 μmol/L的DHEA处理阴性对照小干扰RNA转染细胞48 h后，再用10%中浓度四物汤含药血清处理72 h）、四物汤+si-FBP1组（以50 μmol/L的DHEA处理FBP1小干扰RNA转染细胞48 h后，再用10%中浓度四物汤含药血清处理72 h），考察敲低FBP1对四物汤上述作用的影响。
结果
2
与对照组比较，DHEA组细胞的自噬体数量明显增加，LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ、p-mTOR/mTOR、FBP1蛋白及mRNA的表达水平均显著升高，p62蛋白的表达水平显著降低（
P
＜0.05）。与DHEA组和空白血清组比较，中浓度四物汤含药血清组细胞的自噬体数量明显减少，LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ显著降低，p-mTOR/mTOR和p62蛋白、FBP1蛋白及mRNA的表达水平均显著升高（
P
＜0.05）。敲低FBP1后，与四物汤+si-NC组比较，四物汤+si-FBP1组细胞的存活率、p62蛋白的表达水平、FBP1蛋白及mRNA的表达水平、p-mTOR/mTOR均显著降低，LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ显著升高（
P
＜0.05）。
结论
2
四物汤可通过上调KGN细胞中FBP1蛋白及mRNA的表达来促进mTOR蛋白的磷酸化，从而抑制其自噬。
Abstract
OBJECTIVE
2
To investigate the effects of medicated serum of Siwutang on autophagy of ovarian granulosa cells （KGN cells） in polycystic ovarian syndrome （PCOS） and its underlying mechanism.
METHODS
2
Blank serum and different-concentration medicated serum of Siwutang were prepared by intragastric administration of normal saline and different doses of Siwutang [0.52， 1.04， 2.08 g/（kg·d）] in 3-month-old female SD rats. After screening the intervention concentration of Siwutang medicated serum， KGN cells were divided into control group （without any treatment）， dehydroepiandrosterone （DHEA） group （treated with 50 μmol/L DHEA for 48 h）， blank serum group （treated with 50 μmol/L DHEA for 48 h and with 10% blank serum for 72 h） and medium-concentration of Siwutang medicated serum group （treated with 50 μmol/L DHEA for 48 h and with 10% medium-concentration Siwutang medicated serum for 72 h）. The number of autophagosomes was observed in each group， and protein expressions of pathway-related proteins [fructose-1， 6-bisphosphatase 1 （FBP1），mammalian target of rapamycin （mTOR）， phosphorylated mTOR （p-mTOR）]， autophagy-related proteins [p62， microtubule-associated protein 1 light chain 3 （LC3）] and mRNA expression of FBP1 were also detected. The （transfected） cells were further divided into Siwutang group （treated with 10% medium dose of Siwutang medicated serum for 72 h after 48 h intervention with 50 μmol/L DHEA）， Siwutang+si-NC group [negative control small interfering RNA （siRNA） transfected cells treated with 50 μmol/L DHEA for 48 h， and then with 10% medium-concentration of Siwutang medicated serum for 72 h] and Siwutang+si-FBP1 group （FBP1 siRNA transfected cells treated with 50 μmol/L DHEA for 48 h， and then with 10% medium-concentration Siwutang medicated serum for 72 h）. The effects of knocking down FBP1 on the above-mentioned effects of Siwutang were detected.
RESULTS
2
Compared with control group， DHEA group exhibited an increase in the number of autophagosomes， an elevated LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ and p-mTOR/mTOR， as well as increases in protein and mRNA expressions of FBP1， and decreased protein expression of p62 （
P
＜0.05）. Compared to both DHEA group and blank serum group， the medium-concentration of Siwutang medicated serum group showed a decrease in the number of autophagosomes， a decrease in LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ， and increases in p-mTOR/mTOR， protein expression of p62， protein and mRNA expressions of FBP1 （
P
＜0.05）. After knocking down FBP1， compared with Siwutang+si-NC group， Siwutang+si-FBP1 group showed a significant decrease in cell viability， protein expression of p62 ， protein and mRNA expressions of FBP1 as well as p-mTOR/mTOR， and an increase in LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ （
P
＜0.05）.
CONCLUSIONS
2
Siwutang can promote the phosphorylation of mTOR protein by up-regulating the protein and mRNA expressions of FBP1 in KGN cells， thus inhibiting autophagy of KGN cells.
关键词
Keywords
references
WALKER K ， DECHERNEY A H ， SAUNDERS R . Mens-trual dysfunction in PCOS [J ] . Clin Obstet Gynecol ， 2021 ， 64 （ 1 ）： 119 - 125 .
XU Y L ， QIAO J . Association of insulin resistance and ele-vated androgen levels with polycystic ovarian syndrome（PCOS）：a review of literature [J ] . J Healthc Eng ， 2022 ， 2022 ： 9240569 .
ZHENG Y X ， MA L Z ， LIU N ， et al . Autophagy and apoptosis of porcine ovarian granulosa cells during follicular development [J ] . Animals（Basel） ， 2019 ， 9 （ 12 ）： 1111 .
SAMARE-NAJAF M ， NEISY A ， SAMAREH A ， et al . The constructive and destructive impact of autophagy on both genders’ reproducibility，a comprehensive review [J ] . Autophagy ， 2023 ， 19 （ 12 ）： 3033 - 3061 .
ZHOU F R ， SONG Y F ， LIU X ， et al . Si-wu-tang facilitates ovarian function through improving ovarian microenvironment and angiogenesis in a mouse model of premature ovarian failure [J ] . J Ethnopharmacol ， 2021 ， 280 ： 114431 .
ZHAO S G ， TIAN Y ， GAO X ， et al . Family-based analysis of eight susceptibility loci in polycystic ovary syndrome [J ] . Sci Rep ， 2015 ， 5 ： 12619 .
LIU T ， ZHAO H ， WANG J F ， et al . The role of fructose-1，6-bisphosphatase 1 in abnormal development of ovarian follicles caused by high testosterone concentration [J ] . Mol Med Rep ， 2017 ， 16 （ 5 ）： 6489 - 6498 .
XU Z R ， HAN X ， OU D M ， et al . Targeting PI3K/AKT/mTOR-mediated autophagy for tumor therapy [J ] . Appl Microbiol Biotechnol ， 2020 ， 104 （ 2 ）： 575 - 587 .
马桦 ， 齐大河 ， 陈雯玥 ， 等 . AMPK及mTOR与多囊卵巢综合征的关系及中药干预研究进展 [J ] . 中华中医药学刊 ， 2024 ， 42 （ 2 ）： 164 - 170 .
MA H ， QI D H ， CHEN W Y ， et al . Chinese medicine regulates AMPK or mTOR to treat polycystic ovary syndrome：a review [J ] . Chin Arch Tradit Chin Med ， 2024 ， 42 （ 2 ）： 164 - 170 .
LI X R ， ZHOU K Q ， YIN Z ， et al . Knockdown of FBP1 enhances radiosensitivity in prostate cancer cells by activating autophagy [J ] . Neoplasma ， 2020 ， 67 （ 5 ）： 982 - 991 .
徐王彦君 . 基于UPLC-QTOF MS技术的四物汤灌胃大鼠代谢组学初步研究 [D ] . 合肥 ： 安徽医科大学 ， 2015 .
XU W Y J . Preliminary study on metabonomics in rats after oral administration of Si-wu-tang based on UPLC-QTOF MS [D ] . Hefei ： Anhui Medical University ， 2015 .
陈梦 ， 石丹宁 ， 张则业 ， 等 . 四物汤在大鼠脑和骨骼肌组织中发挥雌激素样效应的机制研究 [J ] . 中国医药 ， 2021 ， 16 （ 10 ）： 1580 - 1584 .
CHEN M ， SHI D N ， ZHANG Z Y ， et al . Study on mechanism of Siwu decoction exerting estrogenic effects on rats brain and skeletal muscle tissues [J ] . China Med ， 2021 ， 16 （ 10 ）： 1580 - 1584 .
谢芬芬 . 褪黑素对青春期DHEA暴露致PCOS的保护机制研究 [D ] . 合肥 ： 安徽医科大学 ， 2020 .
XIE F F . Protective mechanism of melatonin on PCOS induced by DHEA exposure in adolescence [D ] . Hefei ： Anhui Medical University ， 2020 .
林陶秀 ， 张文娟 ， 张悦健 ， 等 . 最佳中药含药血清浓度的筛选方法研究现状 [J ] . 中国实验方剂学杂志 ， 2023 ， 29 （ 2 ）： 195 - 202 .
LIN T X ， ZHANG W J ， ZHANG Y J ， et al . Screening methods for optimal serum concentration of Chinese medicine：a review [J ] . Chin J Exp Tradit Med Formulae ， 2023 ， 29 （ 2 ）： 195 - 202 .
ZHANG T J ， BASANG W D ， CHANG W H ， et al . Dynamics of apoptosis-related gene expression during follicular development in yak [J ] . J Anim Physiol Anim Nutr（Berl） ， 2021 ， 105 （ 6 ）： 1002 - 1013 .
HUANG G C ， TSAI Y Z ， LEE C J ， et al . Elucidation of the effects of Si-wu tang on menstrual disorder patterns through activation of aromatase and antioxidation [J ] . Evid Based Complement Alternat Med ， 2019 ， 2019 ： 4761651 .
KUMARIYA S ， UBBA V ， JHA R K ， et al . Autophagy in ovary and polycystic ovary syndrome：role，dispute and future perspective [J ] . Autophagy ， 2021 ， 17 （ 10 ）： 2706 - 2733 .
ZHAO H G ， ZHANG X ， WANG M ， et al . Stigmasterol simultaneously induces apoptosis and protective autophagy by inhibiting Akt/mTOR pathway in gastric cancer cells [J ] . Front Oncol ， 2021 ， 11 ： 629008 .
KIM M J ， SONG Y R ， KIM Y E ， et al . Kaempferol stimulation of autophagy regulates the ferroptosis under the oxidative stress as mediated with AMP-activated protein kinase [J ] . Free Radic Biol Med ， 2023 ， 208 ： 630 - 642 .
LI D ， YOU Y ， BI F F ， et al . Autophagy is activated in the ovarian tissue of polycystic ovary syndrome [J ] . Repro-duction ， 2018 ， 155 （ 1 ）： 85 - 92 .
MIN Z Y ， GAO Q ， ZHEN X M ， et al . New insights into the genic and metabolic characteristics of induced pluripotent stem cells from polycystic ovary syndrome women [J ] . Stem Cell Res Ther ， 2018 ， 9 （ 1 ）： 210 .
0
Views
96
下载量
0
CSCD
- L-PDFDownload
- WORDDownload
- Meta-XMLDownload
- BibTeXDownload
- EndnoteDownload
- RefMan Download
- NoteExpressDownload
- NoteFirstDownload
Publicity Resources
Related Articles
Related Author
Related Institution
- Address：8th Floor, Sihuan Building, No. 129 Daping Main Street, Yuzhong District, Chongqing, China Postal code：400042
- Technical support is provided by Beijing Founder Electronics co., LTD 渝ICP备15012710号
公网安备50010302001817 - It is recommended to read the content of this site in Chrome&IE9+. Please switch to extreme mode in browser 360.
- Cookies We use cookies to help provide and enhance our service and tailor content. By continuing, you agree to the use of cookies.