HPLC法同时测定真武汤中11种活性成分的含量

田萍; 马开; 张薇; 张迪文; 刘碧碧; 郭晓燕; 韩德恩

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HPLC法同时测定真武汤中11种活性成分的含量

更新时间：2023-03-01

- HPLC法同时测定真武汤中11种活性成分的含量
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- 中国药房 2019年30卷第18期
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- 纸质出版日期：2019，
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田萍, 马开, 张薇, 等. HPLC法同时测定真武汤中11种活性成分的含量[J]. 中国药房, 2019,30(18).
田萍, 马开, 张薇, 等. HPLC法同时测定真武汤中11种活性成分的含量[J]. 中国药房, 2019,30(18). DOI：

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摘要

目的：建立同时测定真武汤中5-羟甲基糠醛、（+）-儿茶素、芍药苷、苯甲酰乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱、苯甲酰芍药苷、6-姜酚、8-姜酚、白术内酯Ⅱ、6-姜烯酚、茯苓酸含量的方法。方法：采用高效液相色谱法。色谱柱为Phenomenex Kinetex C18，流动相为乙腈-0.2％磷酸水溶液（梯度洗脱），流速为1.0 mL/min，检测波长为285 nm（4.4～7 min，5-羟甲基糠醛）、203 nm[7～12 min，（+）-儿茶素]、233 nm（12～50 min，芍药苷、苯甲酰乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱、苯甲酰芍药苷）、200 nm（50～62.3 min，6-姜酚、8-姜酚；62.9～90 min，6-姜烯酚、茯苓酸）、222 nm（62.3～62.9 min，白术内酯Ⅱ），柱温为35 ℃，进样量为20 μL。结果：5-羟甲基糠醛、（+）-儿茶素、芍药苷、苯甲酰乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱、苯甲酰芍药苷、6-姜酚、8-姜酚、白术内酯Ⅱ、6-姜烯酚、茯苓酸检测质量浓度线性范围分别为0.62～12.47 μg/mL（r＝0.999 6）、2.36～47.25 μg/mL（r＝0.999 7）、200.80～4 016 μg/mL（r＝0.999 7）、4.45～89.04 μg/mL（r＝0.999 6）、4.28～85.54 μg/mL（r＝0.999 5）、5.16～103.13 μg/mL（r＝0.999 9）、5.53～110.66 μg/mL（r＝0.999 9）、0.84～16.89 μg/mL（r＝0.999 8）、0.60～12.04 μg/mL（r＝0.999 9）、0.53～10.62 μg/mL（r＝0.999 5）、1.04～20.78 μg/mL（r＝0.999 7）；定量限分别为0.155、0.590、1.210、1.112、1.070、0.258、0.553、0.421、0.153、0.354、0.431 μg/mL，检测限分别为0.047、0.179、0.134、0.337、0.324、0.078、0.168、0.128、0.046、0.107、0.131 μg/mL，精密度、稳定性、重复性试验的RSD均小于3％；加样回收率分别为96.06％～103.01％（RSD＝2.64％，n＝6）、95.11％～101.57％（RSD＝2.58％，n＝6）、97.22％～102.11％（RSD＝1.93％，n＝6）、96.43％～102.78％（RSD＝2.35％，n＝6）、96.42％～101.43％（RSD＝2.15％，n＝6）、96.86％～102.05％（RSD＝2.10％，n＝6）、95.32％～100.55％（RSD＝1.87％，n＝6）、97.04％～103.25％（RSD＝2.22％，n＝6）、96.78％～103.22％（RSD＝2.62％，n＝6）、97.04％～103.14％（RSD＝2.28％，n＝6）、97.08％～103.51％（RSD＝2.94％，n＝6）。结论：该方法准确、专属性好，可用于同时测定真武汤中11种活性成分的含量。

Abstract

OBJECTIVE： To establish a method for simultaneous determination of eleven active constituents in Zhenwutang decoction， such as 5-hydroxymethylfurfural，（+）-cianidanol， paeoniflorin， benzoylaconitine， benzoylhypacoitine， benzoylpaeoniflorin， 6-gingerol， 8-gingerol， atractylenolide Ⅱ， 6-shogaol and pachymic acid. METHODS： HPLC method was adopted. The separation was performed on Phenomenex Kinetex C18 column with mobile phase consisted of acetonitrile-0.2 ％ phosphoric acid solution（gradient elution） at flow rate of 1.0 mL/min. The detection wavelength was set at 285 nm （4.4-7 min， 5-hydroxymethylfurfural）， 203 nm [7-12 min，（+）-cianidanol]， 233 nm （12-50 min，paeoniflorin， benzoylaconitine， benzoylhypacoitine， benzoylpaeoni- florin）， 200 nm （50-62.3 min， 6-gingerol， 8-gingerol； 62.9-90 min， 6-shogaol， pachymic acid） and 222 nm （62.3-62.9 min， atractylenolide Ⅱ）. The column temperature was set at 35 ℃， and the sample size was 20 μL. RESULTS： The linear ranges of 5-hydroxymethylfurfural，（+） -cianidanol， paeoniflorin， benzoylaconitine， benzoylhypacoitine， benzoylpaeoniflorin， 6-gingerol， 8-gingerol， atractylenolide Ⅱ， 6-shogaol， pachymic acid were 0.62-12.47 μg/mL （r＝0.999 6），2.36-47.25 μg/mL （r＝0.999 7），200.80-4 016 μg/mL （r＝0.999 7），4.45-89.04 μg/mL （r＝0.999 6），4.28-85.54 μg/mL （r＝0.999 5），5.16-103.13 μg/mL （r＝0.999 9），5.53-110.66 μg/mL （r＝0.999 9），0.84-16.89 μg/mL （r＝0.999 8），0.60-12.04 μg/mL （r＝0.999 9），0.53-10.62 μg/mL （r＝0.999 5），1.04-20.78 μg/mL （r＝0.999 7）， respectively. The limits of quantitation were 0.155， 0.590， 1.210， 1.112， 1.070， 0.258， 0.553， 0.421， 0.153， 0.354， 0.431 μg/mL， respectively. The limits of detection were 0.047， 0.179， 0.134， 0.337， 0.324， 0.078， 0.168， 0.128， 0.046， 0.107， 0.131 μg/mL， respectively. RSDs of precision， stability and reproducibility tests were all lower than 3％. The average recovery rates were 96.06％-103.01％（RSD＝2.64％，n＝6）， 95.11％-101.57％（RSD＝2.58％，n＝6）， 97.22％-102.11％（RSD＝1.93％，n＝6）， 96.43％-102.78％（RSD＝2.35％，n＝6）， 96.42％-101.43％（RSD＝2.15％，n＝6）， 96.86％-102.05％（RSD＝2.10％，n＝6）， 95.32％-100.55％（RSD＝1.87％，n＝6）， 97.04％-103.25％（RSD＝2.22％，n＝6）， 96.78％-103.22％（RSD＝2.62％，n＝6）， 97.04％-103.14％（RSD＝2.28％，n＝6）， 97.08％-103.51％（RSD＝2.94％，n＝6）， respectively. CONCLUSIONS： The method is accurate and specific， and suitable for simultaneous determination 11 active components of Zhenwutang decoction.

关键词

真武汤高效液相色谱法5-羟甲基糠醛（+）-儿茶素芍药苷苯甲酰乌头原碱苯甲酰次乌头原碱苯甲酰芍药苷6-姜酚8-姜酚白术内酯Ⅱ6-姜烯酚茯苓酸含量测定

Keywords

Zhenwutang decoctionHPLC5-hydroxymethylfurfural（+）-cianidanolPaeoniflorinBenzoylaconitineBenzoylhypacoitineBenzoylpaeoniflorin6-gingerol8-gingerolAtractylenolide Ⅱ6-shogaolPachymic acidContent determination

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