小檗碱通过下调METTL3表达抑制肾癌细胞侵袭和迁移的机制

杨天宇; 帅立雄; 许竞泽; 程馨阳; 许志明; 张永胜

doi:10.6039/j.issn.1001-0408.2023.15.14

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小檗碱通过下调METTL3表达抑制肾癌细胞侵袭和迁移的机制

药学研究 | 更新时间：2023-08-10

- 小檗碱通过下调METTL3表达抑制肾癌细胞侵袭和迁移的机制
- Mechanism of berberine inhibiting invasion and migration of renal carcinoma cells by down-regulating the expression of METTL3
- 中国药房 2023年34卷第15期页码：1863-1868
- 作者机构：
  
  苏州大学附属第二医院病理科，江苏苏州　215004
- 作者简介：
  
  住院医师，硕士。研究方向：肿瘤病理学。电话：0512-67783457。E-mail：445999886@qq.com
  主任医师，硕士生导师。研究方向：肿瘤病理学。电话：0512-67783457。E-mail：shengyongzh@126.com
- 基金信息：
  
  苏州市科技发展项目(SYS2020146);苏州市医学重点扶持学科(SZFCXK202137)
- DOI：10.6039/j.issn.1001-0408.2023.15.14
  中图分类号： R965
- 纸质出版日期：2023-08-15，
  
  收稿日期：2023-01-30，
  
  修回日期：2023-06-18，
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杨天宇,帅立雄,许竞泽等.小檗碱通过下调METTL3表达抑制肾癌细胞侵袭和迁移的机制 ^Δ[J].中国药房,2023,34(15):1863-1868.

YANG Tianyu,SHUAI Lixiong,XU Jingze,et al.Mechanism of berberine inhibiting invasion and migration of renal carcinoma cells by down-regulating the expression of METTL3[J].ZHONGGUO YAOFANG,2023,34(15):1863-1868.
杨天宇,帅立雄,许竞泽等.小檗碱通过下调METTL3表达抑制肾癌细胞侵袭和迁移的机制 ^Δ[J].中国药房,2023,34(15):1863-1868. DOI： 10.6039/j.issn.1001-0408.2023.15.14.

YANG Tianyu,SHUAI Lixiong,XU Jingze,et al.Mechanism of berberine inhibiting invasion and migration of renal carcinoma cells by down-regulating the expression of METTL3[J].ZHONGGUO YAOFANG,2023,34(15):1863-1868. DOI： 10.6039/j.issn.1001-0408.2023.15.14.

摘要

目的

探讨小檗碱（BER）对人肾癌细胞侵袭、迁移的抑制作用及可能机制。

方法

以人肾癌OSRC-2细胞为对象进行实验。采用alamarBlue法测定0（对照组）、25、50、75、100、125、150、175、200 μmol/L BER作用24、48 h后对OSRC-2细胞增殖的抑制作用。用0（对照组）、50、100 μmol/L BER作用于细胞48 h后，通过流式细胞术分析BER对细胞周期的影响；通过细胞划痕实验观察24、36 h时各组细胞的迁移能力；通过Transwell实验观察作用24 h时各组细胞的侵袭能力；并通过Western blot法检测上述药物作用48 h后细胞中甲基转移酶样蛋白3（METTL3）的蛋白表达，通过RNA甲基化定量试剂盒检测各组细胞内RNA的N6-甲基腺嘌呤（m6A）水平。

结果

与对照组比较，不同浓度BER均可显著升高OSRC-2细胞的增殖抑制率（

＜0.01），并呈时间和浓度依赖性趋势；50、100 μmol/L BER作用48 h后可将细胞周期阻滞在G

期（

＜0.01）；50、100 μmol/L BER组细胞的迁移、侵袭能力均显著降低（

＜0.05或

＜0.01），细胞中METTL3蛋白的表达水平和RNA的m6A水平均显著降低（

＜0.01）。

结论

BER可通过下调METTL3的表达，进而抑制m6A水平，从而抑制人肾癌细胞的侵袭、迁移。

Abstract

OBJECTIVE

To investigate the inhibitory effect of berberine （BER） on the invasion and migration of human renal carcinoma cells and its potential mechanism.

METHODS

Using human renal carcinoma OSRC-2 cell as object， alamarBlue assay was adopted to detect the inhibitory effects of 0 （control group）， 25， 50， 75， 100， 125， 150， 175 and 200 μmol/L BER on the proliferation of OSRC-2 cell after treatment for 24 h and 48 h. After treated with 0（control group）， 50， 100 μmol/L BER for 48 h， the effect of BER on cell cycle was analyzed by flow cytometry. The migration of OSRC-2 cells in 24 h and 36 h was observed by cell scratch test， and the invasion ability of OSRC-2 cells in 24 h was detected by Transwell assay. The protein expression of methyltransferase-like 3 （METTL3） was detected by Western blot after treatment for 48 h， and RNA methylation quantification kit was used to detect the levels of N6-methyladenosine （m6A） in OSRC-2 cells.

RESULTS

Compared with control group， BER at different concentrations could significantly decrease the survival rate of OSRC-2 cells （

＜0.01）， and showed a dose-dependent and time-dependent manner. After 48 h of BER treatment at 50， 100 μmol/L， the cell was arrested in G

phase （

＜0.01）. Compared with control group， the migration and invasion abilities of cells in 50， 100 μmol/L BER group were significantly decreased （

＜0.05 or

＜0.01）； the protein expression of METTL3 and the level of m6A in RNA were significantly decreased（

＜0.01）.

CONCLUSIONS

BER can inhibit level of m6A by down-regulating the expression of METTL3， thereby inhibiting the invasion and metastasis of human renal carcinoma cells.

关键词

小檗碱人肾癌OSRC-2细胞迁移侵袭甲基转移酶样蛋白3N6-甲基腺嘌呤

Keywords

human renal carcinoma OSRC-2 cellmigrationinvasionmethyltransferase-like 3N6-methyladenosine

references

SUNG H，FERLAY J，SIEGEL R L，et al. Global cancer statistics 2020：GLOBOCAN estimates of incidence and mortality worldwide for 36 cancers in 185 countries[J]. CA Cancer J Clin，2021，71（3）：209-249.

SONG D Y，HAO J Y，FAN D M. Biological properties and clinical applications of berberine[J].Front Med，2020，14（5）：564-582.

WANG N，FENG Y G，CHEUNG F，et al. A Chinese medicine formula Gegen Qinlian Decoction suppresses expansion of human renal carcinoma with inhibition of matrix metalloproteinase-2[J]. Integr Cancer Ther，2015，14（1）：75-85.

LOPES T Z，DE MORAES F R，TEDESCO A C，et al. Berberine associated photodynamic therapy promotes autophagy and apoptosis via ROS generation in renal carcinoma cells[J]. Biomedecine Pharmacother，2020，123：109794.

ZHAO Z Y，ZENG J H，GUO Q，et al. Berberine suppresses stemness and tumorigenicity of colorectal cancer stem-like cells by inhibiting m6A methylation[J]. Front Oncol，2021，11：775418.

CAI J R，YANG F，ZHAN H L，et al. RNA m6A methyltransferase METTL3 promotes the growth of prostate cancer by regulating hedgehog pathway[J]. Onco Targets Ther，2019，12：9143-9152.

ZHU D W，LIU Y T，CHEN J J，et al. The methyltransfe- rase METTL3 promotes tumorigenesis via mediating HHLA2 mRNA m6A modification in human renal cell carcinoma[J]. J Transl Med，2022，20（1）：298.

GUEVELOU J L，SARGOS P，SIVA S，et al. The emer- ging role of extracranial stereotactic ablative radiotherapy for metastatic renal cell carcinoma：a systematic review[J]. Eur Urol Focus，2023，9（1）：114-124.

ALBIGES L，POWLES T，STAEHLER M，et al. Updated European Association of Urology guidelines on renal cell carcinoma：immune checkpoint inhibition is the new backbone in first-line treatment of metastatic clear-cell renal cell carcinoma[J]. Eur Urol，2019，76（2）：151-156.

GONG D K，ZHANG J，CHEN Y H，et al. The m6A-suppressed P2RX6 activation promotes renal cancer cells migration and invasion through ATP-induced Ca2+ influx modulating ERK1/2 phosphorylation and MMP9 sig- naling pathway[J]. J Exp Clin Cancer Res，2019，38（1）：233.

LI S Y，SHI C J，FU W M，et al. Berberine inhibits tumour growth in vivo and in vitro through suppressing the lincROR-Wnt/β-catenin regulatory axis in colorectal cancer[J]. J Pharm Pharmacol，2023，75（1）：129-138.

ZHAO M Y，YANG Y，NIAN Q，et al. Phytochemicals and mitochondria：therapeutic allies against gastric cancer[J]. Phytomedicine，2023，110：154608.

SKONIECZNA M，ADAMIEC-ORGANISCIOK M，HUDY D，et al. Hepatocellular cancer cell lines，Hep-3B and Hep-G2 display the pleiotropic response to resveratrol and berberine[J]. Adv Med Sci，2022，67（2）：379-385.

WANG Z，ZHOU J，ZHANG H，et al. RNA m（6） A methylation in cancer[J]. Mol Oncol，2023，17（2）：195-229.

LIU S P，LI Q J，CHEN K，et al. The emerging molecular mechanism of m6A modulators in tumorigenesis and cancer progression[J]. Biomedecine Pharmacother，2020，127：110098.

LIU L，LI H，HU D Y，et al. Insights into N6-methyladenosine and programmed cell death in cancer[J]. Mol Cancer，2022，21（1）：32.

CHENG M S，SHENG L，GAO Q，et al. The m6A methyltransferase METTL3 promotes bladder cancer progression via AFF4/NF-κB/MYC signaling network[J]. Oncogene，2019，38（19）：3667-3680.

ZHAO J X，LU L G. Interplay between RNA methylation eraser FTO and writer METTL3 in renal clear cell carcinoma patient survival[J]. Recent Pat Anticancer Drug Discov，2021，16（3）：363-376.

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